การจัดการ การตรึง และการขนส่งตัวอย่างชิ้นเนื้อเต้านมที่ได้มาตรฐาน

https://www.mayoclinic.org/tests-procedures/breast-biopsy/about/pac-20384812

คุณภาพสูง-การตรวจชิ้นเนื้อเต้านมไม่เพียงขึ้นอยู่กับความแม่นยำของนักรังสีวิทยาเท่านั้น แต่ยังขึ้นอยู่กับการจัดการสิ่งส่งตรวจที่เป็นมาตรฐานของนักพยาธิวิทยาอย่างเท่าเทียมกันอีกด้วย ทุกขั้นตอนตั้งแต่การสกัดเนื้อเยื่อไปจนถึงการเตรียมสไลด์สามารถส่งผลต่อการวินิจฉัยขั้นสุดท้ายได้ บทความนี้จะติดตามการเดินทางของตัวอย่าง โดยให้รายละเอียดเกี่ยวกับวิธีการตรวจสอบให้แน่ใจว่าตัวอย่างทุกตัวอย่างให้ข้อมูลการวินิจฉัยที่แม่นยำ

1. การเก็บตัวอย่างและการตรวจสอบเบื้องต้น

ขณะยิง แพทย์จะเปิดรอยบากของเข็มเพื่อดึงตัวอย่างอันมีค่า-ซึ่งเป็นเส้นเล็กๆ ที่มักเป็นสีเทา- สีขาวหรือสีเหลือง- คล้ายแกนเนื้อเยื่อ

• การสอบรวม:​ ประเมินความซื่อสัตย์ก่อน แกน CNB ในอุดมคติจะเป็นทรงกระบอก ยาว 1–1.5 ซม. มีเส้นผ่านศูนย์กลางประมาณ 1–2 มม. ชิ้นงานที่มีเม็ดทรายกระจัดกระจายอาจบ่งบอกถึงการกำหนดเป้าหมายที่ไม่ดี (เช่น ศูนย์รวมแคลเซียม) หรือปัญหาทางเทคนิค
• การตรวจสอบปริมาณ:​ บันทึกจำนวนคอร์ที่ดึงมา ต้องใช้คอร์ขั้นต่ำ 3–4 คอร์เพื่อรองรับการตรวจเนื้อเยื่อวิทยาตามปกติ อิมมูโนฮิสโตเคมี และการทดสอบระดับโมเลกุลที่อาจเกิดขึ้น

2. การแก้ไขที่รวดเร็วและเพียงพอ: ความสำคัญยิ่ง

การตรึงเป็นขั้นตอนทางเคมีขั้นตอนแรกและสำคัญที่สุดในการประมวลผลชิ้นงานทดสอบ โดยจะฆ่าเซลล์อย่างรวดเร็ว แข็งตัวของโปรตีน ป้องกันการสลายตัวอัตโนมัติ/การเน่าเปื่อย และรักษาสถาปัตยกรรมไมโครได้อย่างเหมาะสม

• ตัวเลือกการตรึง:​ ฟอร์มาลินบัฟเฟอร์เป็นกลาง 10% (NBF)​ คือมาตรฐานที่สมบูรณ์ การแทรกซึมที่ดีเยี่ยม การยึดเกาะสม่ำเสมอ การย้อมสีนิวเคลียร์/ไซโตพลาสซึมที่ดีไม่เคยใช้แอลกอฮอล์ กลูตาราลดีไฮด์ หรือสารละลายที่ไม่ได้มาตรฐาน-
• ระยะเวลา:​ ตัวอย่างต้องอยู่ในสารยึดเกาะโดยทันที​ เมื่อทำการสกัด การตรึงล่าช้าทำให้เกิดการย่อยสลายของ DNA ส่งผลให้ IHC และผลลัพธ์ระดับโมเลกุลลดลง
• อัตราส่วนปริมาณ:​ ปริมาณคงที่จะต้องเป็น4–10 ครั้ง​ ปริมาตรของชิ้นงานทดสอบ สำคัญสำหรับคอร์ขนาดเล็ก ความสามารถในการบัฟเฟอร์ไอเสียแบบตรึงไม่เพียงพอ ลดค่า pH ทำให้เนื้อเยื่อเป็นกรด และทำลายแอนติเจน
• ระยะเวลา:​ การตรึงในอุดมคติ:6–48 ชั่วโมง. ภายใต้-การตรึง (<6h) causes soft, difficult-to-section tissue. Over-fixation (>72 ชม.) เสี่ยงต่อ "การปกปิดแอนติเจน" ซึ่งจะทำให้การย้อมสี IHC ลดลง

3. พิธีสารการขนส่งที่ได้มาตรฐาน

• คอนเทนเนอร์:​ ภาชนะบรรจุตัวอย่างที่ปิดผนึกอย่างแน่นหนาและป้องกันการรั่ว-
• การติดฉลาก:​ ฉลากจะต้องมีชื่อผู้ป่วย บัตรประจำตัว ตำแหน่งการตรวจชิ้นเนื้อ (เต้านมซ้าย/ขวา ควอแดรนท์) ประเภทสิ่งส่งตรวจ (CNB/VAB) วันที่ และแพทย์ที่สั่ง การติดฉลากที่ไม่ชัดเจนเป็นสาเหตุหลักของการปะปนของตัวอย่าง-
• แบบฟอร์มคำขอ:​ แหล่งข้อมูลทางคลินิกเบื้องต้นของนักพยาธิวิทยา ต้องระบุรายละเอียด: ผลการวิจัยทางคลินิก คำอธิบายภาพ (หมวด BI-RADS) ประวัติเต้านม/การผ่าตัดก่อนหน้า การรักษาด้วยฮอร์โมน และบันทึกขั้นตอนการรักษาโดยย่อ

ขนส่ง:​ ยึดภาชนะไว้ในภาชนะเฉพาะเพื่อป้องกันการหก หลีกเลี่ยงการเขย่าอย่างรุนแรงระหว่างการขนส่งเพื่อรักษาโครงสร้างเนื้อเยื่อที่เปราะบาง

4. ใน-การประมวลผลในห้องปฏิบัติการ

• ใบเสร็จรับเงินและการตรวจสอบ:​ เจ้าหน้าที่พยาธิวิทยา-ตรวจสอบฉลากสิ่งส่งตรวจอีกครั้งกับรายละเอียดคำขอ
• การคายน้ำและการล้าง:​ เครื่องประมวลผลเนื้อเยื่ออัตโนมัติจะรันชิ้นงานทดสอบผ่านแอลกอฮอล์ตามเกรด (การคายน้ำ) ไซลีน (การเคลียร์) และแว็กซ์พาราฟินหลอมเหลว (~12–16 ชั่วโมง)
• การฝัง:​ เนื้อเยื่อที่แทรกซึมจะถูกวางลงในขี้ผึ้งหลอมเหลวภายในแม่พิมพ์ และระบายความร้อนให้กลายเป็นบล็อกพาราฟินสำคัญสำหรับคอร์:จัดแนวแถบทิชชู่ตั้งฉาก​ ไปที่หน้าบล็อกเพื่อเพิ่มการดูแบบตัดขวาง-บนสไลด์ให้สูงสุด
• การแบ่งส่วนและการย้อมสี:​ ไมโครโตมหั่นส่วนต่างๆ 4–5 μm จากบล็อก แล้วติดไว้บนสไลด์แก้ว คราบด้วย Hematoxylin และ Eosin (H&E) และแผ่นปิด นักพยาธิวิทยาตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง

5. พฤติการณ์พิเศษ

• มะเร็งต่อมน้ำเหลืองที่น่าสงสัย:​ เก็บเนื้อเยื่อสดหรือใช้สารยึดเกาะเฉพาะ (เช่น RNAภายหลัง) สำหรับโฟลว์ไซโตเมทรี/การศึกษาทางพันธุกรรม
• การทดสอบ ER/PR:​ มีความไวสูงต่อเวลา/อุณหภูมิในการตรึง จำเป็นต้องปฏิบัติตามระเบียบการอย่างเคร่งครัด
• การทดสอบ HER2:​ ถ้า IHC เป็น 2+ จำเป็นต้องมีการยืนยัน FISH ต้องการมาตรฐานคุณภาพการตรึงสูงสุด

บทสรุป:​ รายงานพยาธิวิทยาที่แม่นยำเริ่มต้นด้วยการตัดชิ้นเนื้อ ขึ้นอยู่กับการตรึง และสิ้นสุดด้วยกล้องจุลทรรศน์โดยผู้เชี่ยวชาญ การทำงานร่วมกันอย่างใกล้ชิดระหว่างแพทย์และนักพยาธิวิทยา ควบคู่ไปกับการกำหนดมาตรฐานที่เข้มงวดของขั้นตอนก่อนการวิเคราะห์ทั้งหมด- ก่อให้เกิดรากฐานของการวินิจฉัยโรคเต้านมที่แม่นยำ